4、PCR反应正确过程应为

A.退火→变性→延伸

B.变性→退火→延伸

C.退火→延伸→变性

D.变性→延伸→退火

E.延伸→变性→退火

正确答案：变性→退火→延伸

5、PCR变性温度一般为

A.95℃

B.85℃

C.72℃

D.55℃

E.100℃

正确答案：95℃

6、在聚丙烯酰胺凝胶中加入SDS结合的蛋白质带有一致的

A.负电荷

B.正电荷

C.正、负电荷

D.根据所加物质增加电荷

E.根据所加物质产生相应电荷

正确答案：负电荷

7、聚丙烯酰胺凝胶是一种人工合成的凝胶，不具有的优点是

A.样品用量小

B.分辨率高

C.化学稳定性高

D.无电渗作用

E.电泳后样品需紫外检测

正确答案：电泳后样品需紫外检测

8、常用于蛋白质定量或定性检测的技术是以下哪一项？

A.Southern blot

B.Northern blot

C.Western blot

D.EMSA

正确答案：Western blot

9、蛋白印迹实验时，为尽可能保证电泳迁移速率取决于分子量的大小，需向聚丙烯酰胺凝胶中加入以下哪种成分？

A.过硫酸铵（APS）

B.十二烷基硫酸钠（SDS）

C.四甲基乙二胺（TMEDA/TEMED）

D.乙二胺四乙酸（EDTA）

正确答案：十二烷基硫酸钠（SDS）

10、以下哪项不是聚丙烯酰胺凝胶的必要成分？

A.甘油（Glycerol）

B.丙烯酰胺（Acrylamide）

C.N，N-亚甲双丙烯酰胺（Methylene-Bis-Acrylamide）

D.四甲基乙二胺（TMEDA/TEMED）

正确答案：甘油（Glycerol）

11、PCR技术需要体内进行。

A.正确

B.错误

正确答案：错误

12、PCR引物设计的目的是在扩增特异性和扩增效率之间取得平衡。

A.正确

B.错误

正确答案：正确

13、PCR可应用于遗传病、肿瘤及病原体检测三大方面。

A.正确

B.错误

正确答案：正确

14、PCR反应体系中Mg2+的作用是促进Taq DNA聚合酶活性。

A.正确

B.错误

正确答案：正确

15、PCR产物具有特异性是因为Taq DNA酶保证了产物的特异性。

A.正确

B.错误

正确答案：错误

16、聚丙烯酰胺凝胶电泳可用于蛋白质、核酸等分子大小不同的物质的分离。

A.正确

B.错误

正确答案：正确

17、转印蛋白时，按照负极-海绵-滤纸-膜-胶-滤纸-海绵-正极顺序依次放置，并且相互之间不应有气泡。

A.正确

B.错误

正确答案：错误

18、蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中迁移时，其迁移率取决于分子量的大小、所带电荷数和蛋白形状等因素。

A.正确

B.错误

正确答案：正确

19、蛋白印迹实验时，应选择与样本不同种系物种的一抗，避免二抗与样本内源性免疫球蛋白产生交叉反应。

A.正确

B.错误

正确答案：正确

20、蛋白印迹中的封闭试剂通过与固相纸膜上自由结合位点饱和结合，减少了免疫探针的非特异性结合，降低了检测时的非特异性结合产生的背景。