何谓中间补料培养？有哪些优点？

正确答案：

（1）中间补料培养是根据菌株生长和初始培养基的特点，在分批培养的某些阶段适当补加培养基，使菌体或其代谢产物的生产时间延长。

（2）优点：

①可以消除底物抑制：某些微生物的生长受到高浓度底物的抑制，如果采用间歇培养，将限制初始初始底物浓度，这样，也就限制了菌体密度和产物浓度的提高。采用补料分批培养可以从较低的底物浓度开始培养，就不存在底物抑制的问题，随后通过不断的流加限制性底物，使菌体能够不断生长，代谢产物也能不断的积累。对于存在葡萄糖效应的体系，通过补料操作，可以避免葡萄糖效应对微生物生长和产物积累的影响。

②可以达到高密度细胞培养：由于补料分批培养能不断的向发酵罐补偿限制性底物，微生物始终能获得充分的营养，菌体密度就可以不断增加，通过选择适当的补料策略并配合氧传递条件的改进，细胞密度可以达到150g干细胞/L，对于以细胞本身或胞内产物作为目标产物的发酵过程，高密度培养显然可以大大提高生产效率。

③延长次级代谢产物的生产时间：次级代谢产物的合成往往与细胞生长速率无关，常常在生长到达稳定期才开始合成，因此与稳定期的细胞密度和延续时间直接相关。在一般的间歇培养中稳定期比较短。因为营养物质已经大量消耗而只能维持很短的时间就进入细胞死亡阶段。这使次级代谢产物的生产时间很短，从而影响了产量。通过补料就可以给微生物生长继续提供所需要的营养，延长稳定期的时间，因此能达到较高的次级代谢产物的生产水平。

④稀释有毒代谢产物：微生物在代谢过程中，都会分泌出一些有毒的代谢产物，对微生物本身的生长产生影响。通过补料就能够稀释有毒的代谢产物，减轻毒害作用，补料操作也能起到稀释产物，降低目标产物抑制作用的效果。

⑤降低染菌和避免遗传不稳定性：补料分批培养的操作时间有限，因此在染菌控制方面不必像连续培养那样严格。菌种的遗传不稳定性问题的影响也与分批培养类似，操作和控制都比较简单。